ELISA試劑盒樣本的加樣方法介紹
Elisa檢測(cè)試驗(yàn)有許多關(guān)鍵技術(shù)點(diǎn),在前面的資訊內(nèi)容中也為我們介紹過不少。近段時(shí)刻,不少的客戶經(jīng)過留言或來電都咨詢過ELISA試劑盒加樣的技巧,今天,我司就為我們?cè)敿?xì)介紹:
1.細(xì)胞上清:
前處理有必要是細(xì)胞離心去除,每孔直接加100μl即可。假如濃度太高需稀釋時(shí),用規(guī)范品稀釋液直接稀釋。
2.腦脊液:
前處理有必要是細(xì)胞離心去除,每孔直接加100μl即可。假如濃度太高需稀釋時(shí),用規(guī)范品稀釋液直接稀釋。
3.安排勻漿液的樣本
要制備過程中需要在緩沖液中參加蛋白酶按捺劑,防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解,形成檢測(cè)成果的值偏低。因安排勻漿液的樣本蛋白種類多,含量豐厚,試驗(yàn)參照血清血漿標(biāo)本的處理方法進(jìn)行,不然就會(huì)影響試驗(yàn)成果。詳細(xì)是參加50 ul樣本剖析緩沖液后加50 ul標(biāo)本,需稀釋時(shí),請(qǐng)將樣本與樣本剖析緩沖液等量參加,缺乏部分用規(guī)范品稀釋液彌補(bǔ)至100ul。
4.血清血漿:
請(qǐng)參加50ul樣本剖析緩沖液后加50ul標(biāo)本,如稀釋量大,請(qǐng)將樣本與樣本剖析緩沖液等量參加,缺乏部分用規(guī)范品稀釋液彌補(bǔ)至100ul。
A 血清標(biāo)本應(yīng)是天然凝結(jié)后,取上清,防止在冰箱中凝結(jié)血液;
B 血漿標(biāo)本,推薦用EDTA的方法搜集若待測(cè)樣本不能及時(shí)檢測(cè),標(biāo)本搜集后請(qǐng)分裝,凍存于-20℃,防止反復(fù)凍融。
C 血清標(biāo)本不該添加任何防腐劑或抗凝劑;
D 標(biāo)本應(yīng)明澈通明,檢測(cè)前樣本中如有懸浮物應(yīng)經(jīng)過離心去除。
E 請(qǐng)勿運(yùn)用溶血,高血脂或污染的標(biāo)本檢測(cè),不然成果將不精確。
因?yàn)榉结樀鞍撞煌?,可能形成降解的蛋白類型可能不一樣,假如試?yàn)前經(jīng)過文獻(xiàn)斷定用哪種蛋白酶按捺劑,有針對(duì)性參加,可節(jié)約按捺劑。假如查不到相關(guān)文獻(xiàn),可采用組合按捺的方法保證蛋白不易被降解。