膽堿酯酶(cholinesterase)屬于特異性酯酶,可分為兩大類。一類是乙酰膽堿酯酶(Acetyl cholinesterase,AChE)又稱為真性膽堿酯酶,能水解乙酰膽堿,起到生理的調(diào)節(jié)作用;另一類為膽堿酯酶,又稱假性膽堿酯酶(Pseudo cholinesterase,PsChE),能水解膽堿的酯而不能水解乙酰膽堿酯。乙酰膽堿酯酶主要存在于神經(jīng)元的胞質(zhì)內(nèi)、神經(jīng)與肌肉接頭處即所謂運動終板處;PsChE主要存在于血漿、胰腺、唾液腺內(nèi),生理功能尚不明確。顯示乙酰膽堿酯酶的方法有Koell法、Snell和Garrett法、Karnovsky和Roots法等。
Leagene乙酰膽堿酯酶染色液(鉛銅硫膽堿法)染色原理是乙酰膽堿酯酶水解碘化乙酰硫代膽堿,釋放乙酸和硫代膽堿,磷酸鹽與鉛離子形成磷酸鉛沉淀,再被S2+置換,形成硫化鉛沉淀。其優(yōu)點是操作簡便、酯酶的擴散較少,其缺點是對底物對組織的滲透性較差,有可能出現(xiàn)假陽性。
產(chǎn)品組成:
編號 名稱 |
DE0055 4×20ml |
DE0055 4×50ml |
Storage |
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試劑(A): AChE孵育液 |
A1: AChE Iodide |
48mg |
120mg |
4℃ 避光 |
A2: AChE Buffer A |
18.4ml |
46 ml |
RT |
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A3: AChE Buffer B |
0.8ml |
2ml |
4℃ 避光 |
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A4: AChE Buffer C |
0.8ml |
2ml |
4℃ 避光 |
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A5: Iso-OMPA |
0.4ml |
1ml |
-20℃ 避光 |
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試劑(B): AChE漂洗液 |
2×20ml |
2×50ml |
RT |
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試劑(C): AChE硫化液 |
2×1ml |
3×1ml |
RT避光 |
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試劑(D): AChE-ChE抑制劑 |
0.4ml |
1ml |
4℃ 避光 |
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使用說明書 |
1份 |
自備材料:
10%甲醛鈣固定液
恒溫培養(yǎng)箱
光學(xué)顯微鏡
染色結(jié)果:
AChE酶活性部位 |
棕黑色 |
細胞核 |
藍色 |
陰性對照(可選):
取配制好的AChE孵育液,按AChE孵育液: AChE-ChE抑制劑=50:1充分混合。取相同切片入含AChE-ChE抑制劑的AChE孵育液中,其余同上,呈陰性反應(yīng)。
注意事項:
本染色液適用于冰凍切片,同時應(yīng)減少切片在室溫暴露的時間。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 6個月有效。